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雙光束紫外可見分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。雙光束紫外可見分光光度計是實驗室、科研機構、醫療、農業、食品廠、飲用水廠等機構必須配備檢驗設備。雙光束紫外可見分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。雙光束紫外可見分光光度計基本原理是指采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比。
雙光束紫外可見分光光度計可用于對物質進行分析鑒定,雙光束紫外可見分光光度計在制藥行業有著很大的前景。根據國內外的書籍記載,已經把很多的藥品紫外線吸收波長和相對應的詳細參數記錄起來,給藥品分析帶來了很大的方便。
雙光束紫外可見分光光度計用于對比分析,把需要測定的樣品與標準樣品放在同等環境下進行測量。如果兩種樣品得到的檢測結果基本一致,就表明這兩種樣品是同種物質。要是沒有標準樣品的話,可以選擇跟已知的標準圖譜對比分析,這種辦法對儀器的要求相當高,檢測環境要求較高。雙光束紫外可見分光光度計在化學學科上的應用,其可以檢驗化學物質的純度,同時也可以推算物質的原子結構,還可以對物質之間的氫鍵進行測定。特別是在有機化學方向的運用,前景更是廣闊,能夠對成分比較復雜的有機化合物進行成分鑒定。
雙光束紫外可見分光光度計主要由電光系統、光學系統、光電系統、電子系統和數據處理、輸出打印系統等幾個部分組成。
(1)電光系統 :電光系統主要由氘燈、鎢燈和相應的電源組成。電光系統對整機的穩定性有很大的影響,是雙光束紫外可見分光光度計不穩定的主要原因之一。
(2)光學系統:光學系統包括外光路系統(轉向平面鏡、聚光鏡)、單色器兩個主要部分;其中,外光路和單色器各有很多類型。單色器是雙光束紫外可見分光光度計雜散光的主要來源,是整機使用時,主要分析誤差的來源之一。
(3)光電系統:夕光電系統是將光信號變為電信號的關鍵部件,直接影響雙光束紫外可見分光光度計的靈敏度和適用范圍;一般有光電管、光電倍增管、硅光電池、二極管陣列等。
(4)電子系統 :電子系統主要由放大器、A/D變換器等組成;其中的放大器,也是影響整機靈敏度、穩定性的主要部件。它又是雙光束紫外可見分光光度計儀器噪聲的主要來源部件,直接影響雙光束紫外可見分光光度計的分析誤差。
(5)數據處理、輸出打印系統 :數據處理、輸出打印系統是決定整機的自動化程度的關鍵部件;特別是軟件部分,直接影響雙光束紫外可見分光光度計的質量。
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